Ихтиоспориды / Мезомицетозои (Ichthyosporea)

ОПИСАНИЕ:

ICHTHYOSPOREA Cavalier-Smith 1998 / Ихтиоспориды (лат. Ichthyosporea), или мезомицетозои (лат. Mesomycetozoea), — класс родственных животным протистов из клады заднежгутиковых. Описано более 40 видов, все они находятся в симбиотических (паразитизм, мутуализм, комменсализм) отношениях с животными.

Тканевые, редко, внутриклеточные, паразиты кишечника рыб, амфибий и ракообразных. Они обладают достаточно сложным жизненным циклом и осмотрофным типом питания. Трофическая стадия представлена многоядерной толстостенной клеткой нередко с центральной вакуолью или включением. Размножение бесполое бинарным делением или фрагментацией плазмодия, приводит в конечном итоге к формированию одноядерных клеток (амеб, жгутиконосцев или неподвижных эндоспор), которые служат расселительными и инвазионными стадиями. Кристы митохондрий пластинчатые, но встречаются и трубчатые. У некоторых видов отмечены септальные гифы.
Класс подразделяется на два отряда: Ichthyophonida и Dermocystida. Ихтиофониды паразитируют на рыбах, амфибиях и беспозвоночных животных, проводя большую часть жизненного цикла в их кишечнике. Расселительные стадии: неподвижные эндоспоры или амебы. Дермоцистиды паразитируют в рыбах, образуя в эпителиях хозяина внутриклеточные и тканевые стадии, плазмодии и цисты, а также продуцируют неподвижные споры или зооспоры с одним задним жгутиком; амебы в их жизненном цикле не отмечены.
Наиболее важны в практическом отношении: Ichthyophonus hoferi, который вызывает поражения различных органов примерно у 80 видов морских и пресноводных рыб, приводящие к смертельному исходу и, соответственно, к значительному экономическому ущербу; Psorospermium haeckeli — паразит соединительной ткани пресноводных раков, которого связывают со значительными коммерческими потерями их запасов; и Rhinosporidium seeberi — паразит млекопитающих, включая человека.

ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ

Первые описания этих паразитов относятся к середине XIX века, когда в кишечнике многоножки был обнаружен Enterobryus elegans (Leidy, 1849). Затем Лейди обнаружил их и в других артроподах, считая растениями. Немного позднее в членистоногих были описаны Psorospermium haeckeli и Amoebidium parasiti- сит (Haeckel, 1857; Cienkowski, 1861). В рыбах первая ихтиоспорида Ichthyophonus hoferi была обнаружена также еще в XIX веке (Hofer, 1893), а затем был описан и паразит человека Rhinosporidium seeberi (Seeber, 1900). Число новых родов, отнесенных в дальнейшем к ихтиоспоридам, увеличивалось медленно, а таксономическое положение этих организмов было неясным и они часто сопровождались эпитетом «загадочные». Определенность в этом отношении внесли только молекулярно-биологические исследования. При изучении проблемы происхождения многоклеточных животных было установлено, что паразиты рыб Ichthyophonus и так называемый rosette agent располагаются на молекулярно-филогенетическом древе вблизи разветвления животных и грибов (Kerk et al., 1995; Spanggaard et al., 1996). Несколько позднее существование такой клады подтвердил Рейган с соавторами (Ragan et al., 1996) при исследовании двух других паразитов рыб. Эти авторы сформировали неформальную группу из четырех родов, назвав ее по начальным буквам их названий (Dermocystidium, rosette agent, Ichthyophonus, Psorospermium) — DRIP (рис. 234). В 1998 году T. Кавалье-Смит выделил их в класс Ichthyosporea (Cavalier-Smith, 1998), поскольку все они являются паразитами рыб, а их клеточная стенка не содержит хитина. Однако отсутствие хитина подвергалось сомнению. Еще ранее было показано наличие хитина в клеточной стенке Ichthyophonus hoferi (Spanggaard et al., 1995), что, правда, затем не подтвердилось (см. главу Морфология), а у Rhinosporidium seeberi найден, по меньшей мере, один ген хитин синтазы (Herr et al., 1999).
После формирования четкой монофилетической группировки на древе опистоконтов, названной подтипом Mesomycetozoa (Mendoza et al., 2002), исследования последних лет привели к описанию 6 новых родов ихтиоспорид: Sphaeroforma, Creolimax, Amphibiocystid- ium, Amphibiothecum, Pirum nAbeoforma (Jostensen et al., 2002; Pascolini et al., 2003; Feldman et al., 2005; Pereira et al., 2005; Marshall et al., 2008; Marshall, Berbee, 2011). Интересно, что уже в 2000 году была опубликована работа, в которой впервые было показано, что трихо- мицет Amoebidium parasiticum из порядка Amoebidiales также относится к DRIP-кладе (Ustinova et al., 2000). Однако наибольший вклад в увеличение разнообразия этой группы внес Кафаро (Cafaro, 2005), который показал, что Enterobryus и 16 других родов трихомицетов порядка Eccrinales по молекулярной филогении входят в состав ихтиоспорид (рис. 235). Сходство представителей Amoebidiales и Eccrinales отмечалось и ранее (Duboscq et al., 1948), а их обособленность от остальных трихомицетов (пор. Harpellales и Asellariales) была показана ультраструктурными исследованиями (Moss, 1999). У этих трихомицетов в отличие от настоящих грибов не обнаружен хитин в клеточной стенке, аппарат Гольджи представлен диктиосомами, а септы образуются только при формировании спорангия, тогда какмногоядерный трофонт не имеет перегородок. Таким образом, молекулярная филогения подтвердила, что порядки Amoebidiales и Eccrinales филогенетически связаны друг с другом и не являются грибами. В то же время удалось показать, что представители этих порядков относятся к отряду Ichthyophonida (Cafaro, 2005).

ОБЩАЯ МОРФОЛОГИЯ СТАДИЙ В ХОДЕ ЖИЗНЕННОГО ЦИКЛА

Все, что мы знаем о жизненном цикле Ichthyophonida, основано на изучении отдельных паразитических стадий, найденных в том или ином хозяине, а также изолированных клонов на искусственной среде. В лабораторных условиях удается получить расселительные стадии в виде амебоидных клеток и эндоспор у некоторых видов Amoebidium, Abeoforma, Pirum, Sphaeroforma, Pseudoperkinsus, Creolimax, Ichthyophonus и Psorospermium (Marshall, 2009). Следовательно, можно предположить, что эти одноядерные стадии являются инфицирующим началом и в природе. Но до сих пор in vivo жизненный цикл не прослежен ни у одного вида. Такая же ситуация складывается и с представителями дермоцистид (Dermocystidium): предполагается, что новое заражение рыб вызывают одножгутиковые зооспоры.
Дермоцистиды формируют шаровидные клетки с эндоспорами. In vitro вышедшие эндоспоры превращаются в одножгутиковые зооспоры, которые являются инфекционным началом. Они заражают хозяина и инцистируются. Затем цисты увеличиваются в размерах и подвергаются делению с образованием эндоспор. Высвобождение эндоспор случается и внутри хозяина, тогда они заражают другие ткани и цикл повторяется.
Ихтиофониды формируют в тканях хозяина шаровидные (Ichthyophonus) или овоидные клетки (Psorospermium haeckeli), или клетки крепятся на поверхности кутикулы (Amoebidium parasiticum). In vitro рецептакулы со спорами вылупляются из овоид- ных клеток. Рецептакулы прорываются, высвобождая эндоспоры, которые трансформируются в амебоидные клетки, способные к инвазии. Попадая в хозяина, амебы развиваются в небольшие рецептакулы, которые в дальнейшем образуют на поверхности клеточную стенку, а внутри них развиваются эндоспоры. Эндоспоры также могут высвобождаться внутри хозяина, повторяя цикл.
Исследование морфологии на светооптическом уровне дает возможность для обнаружения паразитов в ткани или на поверхности кишечного тракта хозяина, и здесь главными признаками являются форма спорангия, его размеры, а также особенности расселительных стадий (детальнее см. раздел Систематический обзор). Особенности строения самих клеток удается рассмотреть только на ультратонких срезах в ТЭМ.
Бывшие трихомицеты порядков Eccrinales (экриниды) и Amoebidiales (амебиды) являются комменсалами многих членистоногих, обитая преимущественно в заднем отделе кишечника. Экриниды характеризуются неветвящимся несептированным многоядерным тро- фонтом (талломом) и субапикальным ростом. Бесполое размножение осуществляется спорами, образующимися в терминальных спорангиях. Выделяют несколько морфотипов спор, которые, в свою очередь, группируют в 2 морфо-функциональные категории: спорангиоспоры первичного заражения (primary infestation sporangiospores) и спорангиоспоры вторичного заражения (secondary infestation sporangiospores). Первичные спорангиоспоры (обычно одноядерные с толстой стенкой) выделяются во внешнюю среду и заражают других хозяев, а вторичные (обычно многоядерные с тонкой стенкой) — распространяют инфекцию в том же хозяине. Для первичных спорангиоспор некоторых экринид характерны придатки в виде одного-двух усиков на каждом полюсе, которые образованы за счет наружного слоя клеточной стенки спорангиоспоры (Moss, 1999). Из спорангиоспоры выходит одна или несколько неподвижных эндоспор или подвижных амеб, которые служат для расселения и заражения новых хозяев. Амебоидные клетки, попадая во внешнюю среду обычно инцистируются.
Исследование экринид затруднено тем, что их не удается культивировать, и, хотя они широко распространены в природе, мы очень мало знаем об их питании, физиологии и экологии.

УЛЬТРАСТРУКТУРА КЛЕТКИ ICHTHYOSPOREA

Ультраструктурные исследования проведены как на зараженных тканях, где были обнаружены различные стадии развития паразитов, так и на выделенных в культуру паразитах. Следует учесть, что толстая оболочка из полисахаридов препятствует проникновению фиксаторов внутрь клетки, поэтому при традиционном (химическом) методе фиксации электронограммы не всегда высокого качества. Например, трудно бывает определить форму крист в митохондриях, или «прочитать» количество мембран, окружающих ту или иную структуру. Эту проблему удается решить, используя метод криоэлектронной микроскопии, при котором фиксируются замороженные объекты (Marshall et al., 2008). При этом лучше сохраняется цитоплазма и выявляются неотмеченные ранее структуры, например, трубчатые выросты и впячивания плазматической мембраны трофонта, правда, внутренние мембраны клетки часто не видны (Marshall et al., 2008; Marshall, Berbee, 2011).
Структура и состав клеточной стенки исключительно важны для определения таксономического положения организма, поэтому были изучены в нескольких работах. Все трофические и многие расселительные стадии ихтиоспорид имеют толстую клеточную стенку, что считается одним из главных признаков класса. Её строение показано во всех работах по ультраструктуре. Отмечается значительная толщина стенки (от 100 нм до нескольких микрон), ее гомогенность или гетерогенность (2-4 слоя). Различия в строении стенки могут быть также связаны с методом фиксации материала.
Окрашивание клеточной стенки у паразита раков Psorospermium haeckeli дает реакцию на коллаген и эластиноподобные белки, гликопротеины и мукополисахариды (Vogt, Rug, 1995), а биохимический анализ четко показывает, что клеточная стенка паразитов рыб Dermocystidium sp. и Ichthyophonus hoferi состоит преимущественно из углеводов (Hedrick et al., 1989; Rand, 1994; Dykova, Lom, 1992). Более того, в одной работе авторы утверждали, что мономеры клеточной стенки I. hoferi представлены N-ацетил-глюкозамином, т.е. мономером хитина (Spanggaard et al., 1996). Наиболее детально состав клеточной стенки был изучен у Sphaeroforma arctica (Jostensen et al., 2002), обитающей в кишечнике амфипод. Она практически полностью состоит из углеводов, жиры отсутствуют, а белки в следовом количестве. Основным компонентом углеводов является N-ацетил-галактозамин. Он составляет до 70% всего сухого веса клетки. Иостенсен с соавторами (Jostensen et al., 2002) подвергают сомнению данные по наличию хитина в клеточной стенке на том основании, что чувствительность метода в работе Спангаарда с коллегами (Spanggaard et al., 1996) была недостаточно высока для такого заключения. Если учесть, что у других представителей класса Ichthyosporea хитин не обнаружен, то можно считать, что по этому признаку все они кардинально отличаются от грибов.

ОСОБЕННОСТИ УЛЬТРАСТРУКТУРЫ DERMOCYSTIDA

Ультратонкое строение отдельных стадий жизненного цикла дермоцистид показано в нескольких работах. Так, изучено формирование одножгутиковых зооспор в спорах Dermocystidium salmonis Davis 1947 (Olson et al., 1991), и ультраструктура D. cyprini Cervinka et Lom 1974 (Lotman et al., 2000). Однако наиболее полно исследованы D. регсае и D. fennicum (Pekkarinen et al., 2003), поэтому последующее описание основано преимущественно на этих данных.
Первыми после заражения в тканях рыбы обнаруживаются внутриклеточные стадии Dermocystidium. Это мелкие (до 2,5 мкм в диаметре) шаровидные клетки, которые содержат крупное ядро с ядрышком, вакуолизированную цитоплазму с множеством рибосом. Клетка покрыта трехслойной оболочкой толщиной около 20 нм, снаружи которой расположен толстый (до 80 нм) войлокоподобный слой. По мере роста паразита трехслойность исчезает, толщина оболочки увеличивается и, у клеток размером примерно 5 мкм, превышает 200 нм. При этом она становится плотной и гомогенной по составу. Клетка паразита отделена от цитоплазмыхозяина электронно-прозрачной зоной.
На стадии небольшого плазмодия (около 15 мкм) толщина оболочки достигает 0,5-1 мкм, кроме того, она образует множественные тонкие наружные выросты. По мере роста плазмодий разрушает клетку хозяина и становится из внутриклеточного тканевым паразитом.
На этой стадии клеточная стенка дифференцируется на плотный наружный слой и более толстый и рыхлый внутренний слой. По мере развития плазмодия ядро увеличивается в размерах, ядрышко также становится крупнее и приобретает гетерогенность. В цитоплазме появляются мелкие липидные вакуоли и вакуоли с плотными гранулами.
На последующих стадиях развития, которые можно считать близкими к зрелому состоянию плазмодия, его клеточная оболочка становится более однородной и толстой, достигая в толщину от 1,5 мкм до 4 и, в отдельных случаях, даже 6 мкм. Несколько отличается по плотности самый наружный слой около 30 нм толщиной. Он покрывает всю поверхность клетки и даже тонкие нитевидные наружные выросты (билли) длиной до 2,5 мкм, которые погружены в цитоплазму клетки хозяина.
Интересно, что у D. регсае и D. fennicum ядра внутри плазмодия можно наблюдать только на ранних стадиях развития. Затем, вплоть до стадии споробласта они не обнаруживаются на срезах, а множество мелких ядер появляется вновь только на предспоробластической стадии (Pekkarinen et al., 2003). Это исчезновение ядер выглядит крайне необычно1. У других дермоцистид в этот период крупное ядро обычно фрагментируется на несколько мелких ядер, которые, в свою очередь, подвергаются делению. Во всяком случае, у D. cyprini (Lotman et al., 2000) дробление крупного ядра на мелкие идет без таких скачкообразных событий. Плазмодий D. cyprini содержит нормальные ядра на всем протяжении развития, а цитоплазма лишена вакуолей с плотными гранулами. Вероятно, ядерные преобразования у D. регсае и D. fennicum имеют свои особенности итребуют отдельного исследования.
Внутри развивающегося плазмодия есть все обычные для эукариотных клеток органеллы: митохондрии с пластинчатыми кристами, диктиосомы аппарата Гольджи, каналы ЭПР, различного размера вакуоли с гранулами, липидные капли и гранулы гликогена обычно собранные в розетки. Изредка в цитоплазме обнаруживаются пучки фибрилл и кристаллоиды.
Перед началом спорогенеза в цитоплазме содержатся крупные липидные глобулы (до 4 мкм в диаметре) и намечаются борозды будущей плазмотомии. К этому времени размеры плазмодия достигают 1-2 мм.
Спорогенез. Перед спорогенезом оболочка плазмодия дифференцируется на два четких слоя: наружный электронно-прозрачный и внутренний более плотный и гетерогенный, образованный как бы чередующимися запятыми. Затем начинается фрагментация плазмодия. Появившиеся перед спорогенезом ядра (ядра споронтов) делятся и дают ядра споробластов. Вокруг каждого ядра, имеющего на этой стадии деспирализованный хроматин и маленькое ядрышко, обособляется небольшой участок цитоплазмы, в котором расположены мелкие осмиофильные глобулы. Эти глобулы появляются в результате дробления крупных липидных капель плазмодия. Рядом с ядром располагается чашевидная диктиосома аппарата Гольджи и центриолярный аппарат с расходящимися от центриолей микротрубочками. Споробласты отделены друг от друга губчатым слоем. В цитоплазме появляется включение в виде округлого тела, которое увеличивается в размерах и по мере превращения споробласта в спору становится все более плотным и занимает центр клетки.
Спора размером 6-8 мкм содержит ядро, плотное центральное включение, митохондрии, цистерны мембран, липидные глобулы и гранулы гликогена. Стенка споры толщиной около 40 нм состоит из фибриллярных и пластинчатых структур.
Зооспорогенез. При инкубировании спор дермоцистидиума в воде они начинают делиться и формируют зооспоры. Сначала увеличивается в размерах ядро, а центральное включение становится менее плотным и уменьшается в размерах. Ядро перемещается в центр клетки, цитоплазма слегка отстает от клеточной стенки, и начинается деление, идущее, по видимому, синхронно: две дочерние клетки споры дают 4, те — 8 и т.д., пока внутри общей оболочки не сформируется несколько клеток — зооспор. Зрелая зооспора содержит одно ядро, к которому прилегает митохондрия с пластинчатыми кристами; включение также образуется вновь, но уже не такое плотное, как внутри споры. По периферии клетки со стороны включения находится структура, похожая на пронизанную отверстиями цистерну ЭПР (румпосому) хитридиомицетов. Имеются липидные глобулы и зёрна гликогена. Рибосомы локализованы в прилегающем к ядру участке цитоплазмы, что также характерно для многих хитридиомицетов (Barr, 1992). Жгутик вырастает из прилегающей к включению кинетосомы непосредственно перед выходом зооспоры из общей оболочки споры. От кинетосомы жгутика отходит вдоль поверхности включения довольно широкий поперечно-исчерченный корешок, охватывающий расположенную перпендикулярно к ней короткую безжгутиковую кинетосому. По меньшей мере, одна микротрубочка идет от кинетосомы вглубь клетки.

ОСОБЕННОСТИ УЛЬТРАСТРУКТУРЫ ICHTHYOPHONIDA

Ультраструктура ихтиофонид известна для нескольких видов. Приведем здесь обобщенные сведения на основании работ по Sphaeroforma arctica (Jostensen et al., 2002), Pirum gemmata и Abeoforma whisleri (Marshall, Berbee, 2011). Эти виды обитают в просвете кишечника амфипод и других морских беспозвоночных.
Мелкие одноядерные клетки Sphaeroforma arctica диаметром 6 мкм имеют однородную по составу клеточную стенку толщиной 100 нм, которая пронизана регулярно расположенными порами. Внутри клетки находится ядро с крупным ядрышком и митохондрии с плотно упакованными пластинчатыми кристами. Крупные клетки диаметром 17 мкм окружены такой же клеточной стенкой. В результате нескольких делений крупной особи образуется 15-25 мелких дочерних клеток диаметром около 5 мкм. Судя по всему, деление идет до тех пор, пока клетки не разорвут материнскую клеточную стенку и не выйдут наружу.
Одноядерные клетки сначала растут, при этом их ядро увеличивается в размерах примерно в 2 раза. Затем ядро делится на два, а дочерние ядра делятся синхронно, формируя, соответственно, 4, 8, 16 и т.д. число ядер. Стенка материнской клетки состоит из двух слоев: наружного плотного и внутреннего рыхлого. В целом клеточная стенка тоньше, чем у дермоцистид. Криоэлектронная микроскопия также выявляет у некоторых видов каналы, или поры, в клеточной стенке. Интересно, что плазматическая мембрана местами образует трубчатые инвагинации внутрь цитоплазмы, или наружные трубчатые выросты, лежащие под клеточной стенкой. Цитоплазма и ее органеллы, в общем мало отличаются от описанных структур дермоцистид: митохондрии с пластинчатыми кристами, за исключением Ichthyophonus hoferi, есть гликогеновые розетки и липидные капли. У ихтиофонид, как и у дермоцистид, имеется крупная центральная вакуоль.
Центросома Ichthyophonida не содержит центриолей, а митотические микротрубочки отходят от электронно-плотной пластинки, которую Маршал с соавторами (Marshall et al., 2008; Marshall, Berbee, 2011) назвал SPB1 (spindle pole body). Эта пластинка у Pirum и Abeoforma имеет серповидную форму, или незамкнутое кольцо диаметром примерно 200 нм. Вокруг серповидного ЦОМТа располагаются цистерны гладкого ЭПР, напоминающие аппарат Гольджи, однако настоящие диктиосомы у представителей этих родов не обнаружены. Тип митоза не известен, но, основываясь на данных по делению ядер в плазмодиях (например, у миксомицетов) можно предположить, что он относится к закрытому типу При этом ядра становятся мельче. Перед делением в процессе образования эндоспор, клетки становятся многоядерными. Плазмодий почти одновременно дробится на мелкие одноядерные эндоспоры, на первых порах покрытые только унитарной мембраной.
У плазмодиев Ichthyophonus hoferi цитоплазма вакуолизирована, и перед спорогенезом в них насчитываются сотни ядер. При спорогенезе у этого вида также идет фрагментация плазмодия, но иногда обособляются группы из нескольких ядер.

ПИТАНИЕ

Очень мало известно о способе питания. Фаготрофия не отмечена ни для одной стадии ихтиоспорид. Считается, что они поглощают питательные вещества из хозяина осмотрофно, через поры в клеточной стенке (Mendoza et al., 2002; Marshall, Berbee, 2011).

РАЗМНОЖЕНИЕ

До последнего времени считалось, что ихтиоспориды размножаются только бесполым путем (Mendoza et al., 2002). Этот процесс освещен в предыдущих разделах. Следует добавить, что при развитии в культуре многоядерные клетки (плазмодии) помимо высвобождения эндоспор или амеб могут размножаться почкованием. При этом отделяющаяся почка содержит несколько ядер. Амебоидные клетки ихтиофонид способны отползать от спорангия, демонстрируя расселительную фунцию. У разных видов амебы могут формировать различные псевдоподии: лобоподии, субпсевдоподии (пальцевидные филоподии) и ветвящиеся длинные филоподии.
После включения экринид в состав ихтиоспорей мы могли бы утверждать, что половой процесс имеет место при лестничной конъюгации Enteropogon sexuale (Hibbits, 1978). Однако клетки после слияния не росли и не делились, поэтому нельзя с уверенностью говорить о наличии полового процесса, который включает, как известно, не отмеченный в упомянутой работе мейоз. С другой стороны, автор проводил наблюдения в течение короткого времени, следовательно, нельзя исключить слияние ядер и последующий мейоз на более поздних стадиях жизненного цикла.
Для решения этой проблемы Маршал (Marshall, 2009) предпринял попытку генетического анализа клонов. Он сравнил гены EFL и HSP70 у двух разных клонов Sphaeroforma (Pseudoperkinsus) sp., и показал, что эти гены в каждом клоне имеют разную историю и отличаются настолько, что нельзя исключить генетическую рекомбинацию. Автор делает заключение, что в гаплоидном жизненном цикле Sphaeroforma (Pseudoperkinsus) sp. имеет место половой процесс. По-видимому, он факультативен и приводит к периодическому появлению кратковременной диплоидной фазы в жизненном цикле этого вида. Вероятно, именно факультативность полового процесса не позволяет обнаружить конъюгацию клеток при исследовании культур Sphaeroforma (Pseudoperkinsus) sp.
По-видимому, эти данные требуют более весомого подтверждения. Здесь отметим лишь, что генетический анализ популяций и клонов оказывается более эффективным и коротким путем для обнаружения полового процесса у протистов, чем прямые наблюдения за их поведением в культуре.

ЭКОЛОГИЯ

Все описанные виды были выделены из животных хозяев и считаются паразитами или симбионтами. Они попадают в организм преимущественно через ротовое отверстие и заселяют кишечник (Jones, Dawe, 2002; Cafaro, 2005). В редких случаях (Amoebidium) паразиты прикрепляются к хозяину снаружи, становясь эпибионтами. Разнообразие ихтиоспорид далеко не исчерпано известными видами. Об этом свидетельствуют многочисленные природные сиквенсы, явно не относящиеся ни к одному из известных таксонов, но расположенные в пределах ветви ихтиоспорид.
Для отряда Ichthyophonida видовая специфичность паразита к хозяину не показана. Более того, у изолятов Creolimax fragrantissima. выделенных из четырех различных хозяев, локусы ITS и EFL оказались идентичны (Marshall et al., 2008), a Ichthyophonus hoferi способен заражать новых хозяев, проходя по пищевой цепочке хищников (Jones, Dawe, 2002). Конечно, нельзя исключить, что существуют неизвестные еще виды с высокой специфичностью к хозяину, или у тех же изолятов будут отличия по другим локусам ДНК, но пока таких данных нет и, в общем, это маловероятно. К настоящему времени уже около 10 видов ихтиофонид культивируются на искусственной среде независимо от хозяина, и это не представляет большой сложности.
Представители родов Creolimax. Sphaeroforma. Pirum. Abeoforma обитают в просвете кишечника, поэтому обладают осмотрофным типом питания. Следовательно, можно предположить, что эти опистоконты сравнительно недавно эволюционировали от свободноживущего предка и еще не приобрели специфичность к хозяину.
Наоборот, дермоцистиды являются облигатными паразитами и, по-видимому, могли коэволюционировать со своими позвоночными хозяевами. Это можно предположить на основе изучения штаммов одного филотипа Rhinosporidium seeberi. у которых локусы ITS отличались в зависимости от вида хозяина и его географического положения (Silva et al., 2005).
Способность к повторному заселению того же хозяина исключительно важна для экринид. Они прикрепляются к кутикуле задней кишки и желудка многих морских ракообразных, но не обнаружены в средней кишке и гепатопанкреасе, не имеющих хитиновой выстилки. Поэтому, сбрасывая кутикулу при линьке, хозяин полностью освобождается от этих паразитов. В результате паразит оказывается во внешней среде и вынужден заселять хозяина вновь. У экринид есть для этого определенная согласованность стадий жизненного цикла. Так, расселение внутри хозяина (вторичное заражение) осуществляется путем фрагментации многоядерного трофонта на клетки различного размера с тонкими покровами и сравнительно небольшим, но неопределенным числом ядер. Перед линькой хозяина паразит формирует первичные спорангиоспоры, имеющие толстую клеточную стенку и 1-4 ядра, т.е. приспособленные для переживания во внешней среде и заражения новых хозяев. Не исключено, что при образовании спор идет мейоз, и гаплоидное поколение подвергается воздействию внешних факторов перед последующей гаметогамией в хозяине. Образование расселительных амебоидных стадий происходит при линьке хозяев и у других ихтиофонид (Whisler, 1965). Другим приспособлением экринид из морских и проточных пресных вод является формирование придатков на поверхности спорангиоспор, которые предположительно замедляют их оседание в толще воды и увеличивают вероятность встречи с новым хозяином.